TIEMPO DE PROTROMBINA

"MEDICIÓN DEL SISTEMA EXTRÍNSECO

TIEMPO DE PROTROMBINA ( TP ) EN UNA ETAPA"

1.    INTRODUCCIÓN.

El análisis de tiempo de Protrombina es sensible a las deficiencias del sistema extrínseco de la coagulación (factores I, II, V, VII ó X ). El TP se utiliza como exploraci6n prequirúrgica para detectar posibles problemas hemorrágicos. Un TP prolongado Generalmente es indicativo de un nivel bajo en uno o más de los factores del sistema de coagulación extrínseco ó común, cuya causa pueden ser trastornos hereditarios de la coagulación, una deficiencia de vitamina K, problemas hepáticos ó ingestión de fármacos. El TP es el análisis de laboratorio más corriente empleado para monitorizar la terapia anticoagulante oral, puesto que es sensible a los factores VII y X.

No es sensible a las deficiencias del sistema intrínseco (factores VIII. IX. XI y XII ) ó a las disfunciones plaquetarias. No puede utilizarse para la monitorización de la terapia de heparina, para la cual está recomendada la determinación del Tiempo de activación Parcial de Tromboplastina ( ATTP)

2.    PRINCIPIO Y METODOLOGÍA

El TP es el tiempo requerido para que se coagule el plasma después de agregarle tromboplastina tisular v una cantidad óptima de cloruro de calcio,  reponiendo el calcio  que fue inactivado con el anticoagulante y agregando una tromboplastina completa para activar la vía extrínseca. El método de referencia de la Prueba del TP en una etapa es el recomendado por el Consejo Internacional de Estandarización en Hematología/Consejo Internacional de Trombosis y Hemostasia (CIEH/CITH).

Los resultados obtenidos dependen de numerosos factores como la temperatura, la calidad del agua, el pH, la fuerza iónica, el método de ensayo utilizado, la recogida y conservación de las muestras, y la población de pacientes en consideración. Los rangos normales de muestras deben ser establecidos para cada laboratorio.

  Para cada nuevo lote de tromboplastina (preparada en el laboratorio o comercial ), se deben establecer valores normales en muestras de plasma, de aproximadamente 20 hombres ó mujeres que no estén tomando anticonceptivos. Para ello, no es necesario que todas las pruebas se efectúen el mismo día. Es preferible hacerlas en días distintos pues así se consigue agregar la variabilidad de día a día. La media y la desviación estándar se calculan a partir de los resultados.

El resultado de la prueba en segundos se convierte a Porcentaje de Actividad normal por medio de una curva de referencia.

El Índice de tiempo de Protrombina se calcula dividiendo el TP por el TP medio Del rango normal del laboratorio, representado por una muestra testigo normal.

  Para emplearse en el control de la medicación anticoagulante, el Índice de Protrombina debe designarse en los informes de laboratorio de manera estándar como Tasa Normalizada Internacional de Protrombina ó INR del inglés International Normalizad Ratio. 

SE SUGIERE PUES, REPORTAR DE LA SIGUIENTE MANERA:

TIEMPO DE PROTROMBINA:

Testigo del dia ……………………………………..X segundos

Plasma Problema …………………………….... …X segundos

Porcentaje de actividad ……………………… ……….%

INR  ………………………………………………………X

3. LISTA DE REQUERIMIENTOS.

3.1  Reactivos

NUM	NOMBRE DEL REACTIVO	CONC	CANTIDAD
1	Reactivo de Tromboplastina.*		200μl
2	Diluyente**		10 ml
3	Anticoagulante Citrato de sodio	3.2 a3.8%	1gota/ml de sangre

*Reactivo de Tromboplastina: Tromboplastina tisular procedente de cerebro de

  conejo, iones de Caldo V estabilizador .

**Diluyente. Estabilizadores y Conservantes. Contiene azida sódica al 0.05% como conservante.

 3.2  Equipo de Laboratorio

-    Baño María con termostato a 37º C

-    Cronometro.

    3.3 Material de Laboratorio

CANTIDAD	DESCRIPCIÓN
1	Micropipeta con punta desechable
1	Tubos de recogida al vacío  con   citrato de sodio al 3.2% ó 3.8%.
1	Gradilla.
3	Tubos de ensayo de fondo redondo que quepan en la Gradilla.
1	Gancho de alambre  metálico,

4.PROCEDIMIENTO

4.1 Técnica:

4.1.1  Calentar previamente un volumen suficiente del reactivo de tromboplastina reconstituido a 37ºC .Tomar las precauciones necesarias para Impedir la evaporación y no mantener a 37ºC sin tapón durante más de 60 minutos antes del uso.

4.1.2. Etiquetar un tubo de ensayo para cada muestra ( paciente y control) del análisis.

4.1.3.  Agregar 0.1 ml de muestra al tubo apropiado.

4.1.4   Incubar cada muestra y control a 37ºC de 3 a 10 min.

4.1.5   Con fuerza, agregar 0.2 ml del reactivo de tromboplastina precalentado, y al mismo tiempo, iniciar el cronometraje de detección de coagulación. 

4.1.6   Anotar el tiempo en segundos requerido para detectar la coagulación.

4.2 Preparación de la Muestra  y del Reactivo.

4.2.1Muestra: No es necesario que el paciente esté en ayunas ni se someta a otra preparación especial. Se recomienda plasma con anticoagulante de citrato de sodio al 3.2% en una proporción de nueve partes de sangre por una de anticoagulante.

4.2.2 Reactivo: El reactivo se prepara de la siguiente manera:

Reconstituir un vial de reactivo de tromboplastina con un vial de diluyente. Los dos componentes deben ser del mismo lote del kit. Volver a tapar el vial e invertirlo suavemente varias veces para garantizar una rehidratación completa. Dejar reposar durante 30 min. A temperatura ambiente. Invertir suavemente antes de su uso para garantizar homogeneidad .El reactivo permanece estable durante cuatro días si se mantiene en el vial original, tapado herméticamente y se almacena a 2-8ºC, y registrar la fecha de la reconstitución en la etiqueta del vial.