PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO”

INDICADORES DE APRENDIZAJE: Realiza la preparación de medios de cultivo basándose en sus conocimientos sobre esterilización y características de las bacterias.

GENERALIDADES: Es el material alimenticio en el que crecen los microorganismos, es uno de los sistemas más importantes para el aislamiento y /o identificación de microorganismos. para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo, este debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, humedad, oxígeno y PH adecuado.

Además de los nutrientes y factores de crecimiento necesarios para un buen desarrollo bacteriano.

Existen medios que se le añaden diferentes materiales de enriquecimiento (azucares, suero, sangre, bilis), o bien sustancias que los vuelven selectivos porque actúan como inhibidores del crecimiento de unas bacterias también se añaden colorantes que actúan como indicadores para identificar cierto tipo de bacterias.

MATERIAL		REACTIVOS
Matraz Erlenmeyer de 250ml		Medio de EBM
Autoclave		Medio de agar cetritrimida
Algodón		Agar nutritivo
Gasa		Sangre
Balanza		Agua destilada
Mechero		Glicerina
Tripie
Malla con asbesto
Caja de Petri estériles desechables.

PROCEDIMIENTO:

AGAR EMB: Es un medio de cultivo para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos gram negativos.

El uso de eosina y azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras.

PREPARACIÓN:- Suspender 36 gr  en medio litro de agua purificada, calentar con agitación suave hasta completar disolución y hervir durante un minuto.

Esterilizar en autoclave a 121 °c (15 libras de presión) durante 15 minutos dejar enfriar a temperatura entre 45 y 50 °c y vaciar en cajas de Petri.

AGAR SANGRE

GENERALIDADES: es un medio enriquecido que se utiliza a demás para la investigación de los diversos tipos de hemolisis (ALFA, BETA Y GAMA). Se utiliza para el crecimiento de estreptococos.

 Para su preparación se utiliza un agar base que puede ser (agar nutritivo, agar Columbia o agar tripticase de soya), Adicionándole 5ml de sangre por cada 100ml de medio (5%)

PREPARACIÓN: Suspender 40gr de agar base en un litro de agua purificada mezclar perfectamente, calentar con agitación frecuente y hervir por un minuto hasta disolución completa esterilizar a 121 °c por 15 minutos enfriar  a 45-50°cy adicionar 5% de sangre estéril desfibrinada.

AGAR CETRIMIDA

Medio de cultivo que sirve para el aislamiento de pseudomonas aeruginosas. Las cetrimina (Bromuro de Cetiltrimetilamonio) inhibe el crecimiento de las bacterias debido a su acción como un compuesto cuaternario de amonio.

PREPARACIÓN: Rehidratar 45.3 gr en medio litro de agua destilada, Agregar 10ml de gricerol, reposar de 10 a 15 minutos, Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante un minuto para disolverlo  por completo. Esterilizar en autoclave a 121°C  durante 15 minutos, enfriar aproximadamente a 45°C vaciar en cajas de Petri estériles.

EJERCICIOS DE PORTAFOLIO DE EVIDENCIA:

1.- Entregar el reporte de la práctica por escrito con hoja de presentación.

2.- Para complementar los conocimientos adquiridos; resuelve el siguiente cuestionario.

a).- ¿Que es un medios de cultivo?

b).- Clasifica los medios de cultivo por su función.

c).- Después de preparado un medio de cultivo. ¿Qué parámetros  de calidad se deben monitorear?

d).- Los medios de cultivo preparados en la actividad. Como se clasifican

e) Además de proporcionar nutrientes. ¿Qué condiciones debe de reunir medio de cultivo)

F).- ¿Cuáles son los factores más importantes ajenos al medio fe cultivo que se deben proporcionar para un desarrollo adecuado de microorganismos?. 

ENVIAR AL CORREO DEL DOCENTE RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA.