PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO”
INDICADORES DE
APRENDIZAJE: Realiza la preparación de medios de cultivo basándose en sus
conocimientos sobre esterilización y características de las bacterias.
GENERALIDADES: Es el
material alimenticio en el que crecen los microorganismos, es uno de los
sistemas más importantes para el aislamiento y /o identificación de
microorganismos. para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo, este debe reunir una serie de
condiciones como son: temperatura, humedad, oxígeno y PH adecuado.
Además de los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios para un buen desarrollo bacteriano.
Existen medios que se le añaden
diferentes materiales de enriquecimiento (azucares, suero, sangre, bilis), o
bien sustancias que los vuelven selectivos porque actúan como inhibidores del
crecimiento de unas bacterias también se añaden colorantes que actúan como
indicadores para identificar cierto tipo de bacterias.
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MATERIAL
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REACTIVOS
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Matraz
Erlenmeyer de 250ml
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Medio
de EBM
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Autoclave
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Medio
de agar cetritrimida
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Algodón
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Agar
nutritivo
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Gasa
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Sangre
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Balanza
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Agua
destilada
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Mechero
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Glicerina
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Tripie
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Malla
con asbesto
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Caja
de Petri estériles desechables.
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PROCEDIMIENTO:
AGAR EMB: Es un medio
de cultivo para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos gram
negativos.
El uso de eosina y
azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadoras de
lactosa de las no fermentadoras.
PREPARACIÓN:- Suspender 36 gr en medio litro de agua purificada, calentar
con agitación suave hasta completar disolución y hervir durante un minuto.
Esterilizar en
autoclave a 121 °c (15 libras de presión) durante 15 minutos dejar enfriar a
temperatura entre 45 y 50 °c y vaciar en cajas de Petri.
AGAR SANGRE
GENERALIDADES: es un medio enriquecido que se utiliza a demás
para la investigación de los diversos tipos de hemolisis (ALFA, BETA Y GAMA).
Se utiliza para el crecimiento de estreptococos.
Para su preparación se utiliza un agar base que
puede ser (agar nutritivo, agar Columbia o agar tripticase de soya),
Adicionándole 5ml de sangre por cada 100ml de medio (5%)
PREPARACIÓN: Suspender 40gr de agar base en un litro de
agua purificada mezclar perfectamente, calentar con agitación frecuente y
hervir por un minuto hasta disolución completa esterilizar a 121 °c por 15
minutos enfriar a 45-50°cy adicionar 5%
de sangre estéril desfibrinada.
AGAR CETRIMIDA
Medio de cultivo que
sirve para el aislamiento de pseudomonas aeruginosas. Las cetrimina (Bromuro de
Cetiltrimetilamonio) inhibe el crecimiento de las bacterias debido a su acción como
un compuesto cuaternario de amonio.
PREPARACIÓN: Rehidratar 45.3 gr en medio litro de agua
destilada, Agregar 10ml de gricerol, reposar de 10 a 15 minutos, Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de
ebullición durante un minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a
121°C durante 15 minutos, enfriar aproximadamente
a 45°C vaciar en cajas de Petri estériles.
EJERCICIOS DE
PORTAFOLIO DE EVIDENCIA:
1.- Entregar el
reporte de la práctica por escrito con hoja de presentación.
2.- Para complementar
los conocimientos adquiridos; resuelve el siguiente cuestionario.
a).- ¿Que es un
medios de cultivo?
b).- Clasifica los
medios de cultivo por su función.
c).- Después de preparado
un medio de cultivo. ¿Qué parámetros de
calidad se deben monitorear?
d).- Los medios de
cultivo preparados en la actividad. Como se clasifican
e) Además de
proporcionar nutrientes. ¿Qué condiciones debe de reunir medio de cultivo)
F).- ¿Cuáles son los
factores más importantes ajenos al medio fe cultivo que se deben proporcionar
para un desarrollo adecuado de microorganismos?.
ENVIAR AL CORREO DEL DOCENTE RESPONSABLE DE LA ASIGNATURA.
