TIPOS Y FUNCIONES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO.
Según su estado físico (consistencia).
1) Medios líquidos: Son los que se
presentan en este estado, denominándose por esta razón caldos. El medio líquido
más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de
extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se
pretende la obtención de una suspensión bacteriana de una determinada
concentración.
2) Medios sólidos: Se preparan a partir de
los medios líquidos, agregándoles un agente gelificante. Los más utilizados son
la gelatina y el agar. Pueden utilizarse para diferentes fines, los más
importantes son: agar comercial para la industria alimenticia, agar
bacteriológico, agares purificados y agarosa, utilizada para electroforesis en
gel.
3) Medios semisólidos: Se preparan a
partir de los medios líquidos, agregando a éstos un agente solidificante en una
proporción menor que para preparar medios sólidos. Uno de sus usos es la
investigación de la movilidad de las bacterias
Según su utilización.
1) Medios
comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda
producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos
especiales. El medio más conocido de este grupo es el agar nutritivo o agar
común, que resulta de la adición de agar al caldo nutritivo.
2) Medios
de enriquecimiento: incorporan una serie de factores indispensables para el
crecimiento de microorganismos exigentes. Este enriquecimiento se hace por
adición de sangre u otros productos biológicos (sangre, suero, leche, huevo, b ilis,
etc.) que aportan dichos factores.
3) Medios selectivos: Son medios
utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias contenidas en una
población poli microbiana. El fundamento de estos medios consiste en facilitar
nutricionalmente el crecimiento de una población microbiana específica.
4) Medios inhibidores: Cuando las
sustancias añadidas a un medio selectivo impiden totalmente el crecimiento de
una población microbiana, se denomina inhibidor. Los medios inhibidores podrían
considerarse como una variante más restrictiva de los medios selectivos.
5) Medios diferenciales: Se utilizan para
poner en evidencia características bioquímicas que ayuden a diferenciar géneros
o especies.
6) Medios de identificación: Son los
destinados a comprobar alguna cualidad específica que puede servirnos para
reconocer la identidad de un microorganismo. Estos medios han de poseer los
elementos necesarios para asegurar el crecimiento de los microorganismos, el
sustrato específico que vaya a ser metabolizado y el indicador que nos muestre
el resultado.
7) Medios de multiplicación: Sirven para
obtener una gran cantidad de células a partir de un microorganismo ya aislado.
Se emplean en la obtención de vacunas, en la investigación y en la industria.
8) Medios de conservación: Se utilizan
para conservar una cepa que, por diversas razones nos interese mantener.
Fundamentalmente se utilizan como controles de calidad de las pruebas y
reactivos utilizados en el Laboratorio de Microbiología.
9) Medios de transporte: Se usan para el
transporte de muestras clínicas que no pueden sembrarse inmediatamente.
Agar Chocolate (CHOC) es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo. Es una variante del agar sangre. Contiene glóbulos rojos, que han
sido lisados por el suave calentamiento a 56 °C. Este agar se usa para el
delicado y exigente crecimiento de bacterias respiratorias, como por ejemplo Haemophilus influenzae.
Estas bacterias necesitan factores de crecimiento,
como el NAD y hematina, componentes que podemos encontrar dentro de los glóbulos
rojos; por lo tanto, un prerrequisito lógico para el crecimiento es la lisis de
los glóbulos rojos. El agar se llama así debido a su parecido con el chocolate,
pero no contiene nada de este.
El agar
MacConkey es un medio de cultivo selectivo y diferencial para bacterias diseñado para aislar
selectivamente bacilosGram negativos y entéricos (encontrados normalmente en el tracto intestinal) y
diferenciarlos sobre la base de la fermentación de la lactosa.1 El cristal violeta y las sales biliares inhiben el crecimiento
de organismos grampositivos, lo que
permite la selección y el aislamiento de bacterias gramnegativas. Las bacterias
entéricas que tienen la habilidad de fermentar lactosa pueden ser detectadas
utilizando el carbohidrato lactosa y el indicador de pH rojo neutro.
Uso.-.
Los
ingredientes necesarios
para este medio son los siguientes: sales biliares (medio inhóspito para el crecimiento de bacterias Gram positivas, excepto Enterococcus y algunas especies de Staphylococcus),
colorante cristal violeta (inhóspito para cierto tipo de bacterias Gram-positivo), indicador rojo neutro (el cual marca microorganismos que fermenten la lactosa), lactosa, peptona y cloruro sódico.3
El agar Sabouraud es un medio de cultivo que
por sus características funciona como medio de enriquecimiento para
hongos y que en caso de contener cloranfenicol u
otro antibiótico, se
convierte en un medio selectivo para
los mismos. El medio contiene peptonas1 y una
elevada concentración de glucosa que favorece el crecimiento de los hongos
sobre las bacterias. Es utilizado para el cultivo de hongos, especialmente dermatofitos, aunque
también pueden desarrollarse en él cierto tipo de bacterias filamentosas tales
como Nocardia.234
Fue
utilizado por primera vez por Raymond Sabouraud en
1892. Más tarde Chester W. Emmons mejoró el medio acercando el pH al
neutro (pH entre 5,5 y 6,0) y disminuyendo el nivel de glucosa para permitir el
crecimiento de otros subcultivos de hongos.
El agar
nutritivo es un medio de cultivo usado
normalmente como rutina para todo tipo de bacteria.
Es muy útil porque permanece sólido incluso a relativamente altas temperaturas.
Además, el crecimiento bacteriano en este agar lo hace en la superficie,
por lo que se distinguen mejor las colonias pequeñas.
En
un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el líquido, y aparece como una
sustancia espesa, con colonias difícilmente observables.
Agar CLED (Agar cistina-lactosa deficiente en
electrolitos)
es
un medio de cultivo diferencial para aislar y contar las bacterias presentes
en la orina.
Favorece el crecimiento de los patógenos y contaminantes urinarios aunque,
debido a la ausencia de electrolitos, impide la indebida proliferación de
especies de Proteus.
Agar R2A
Un agar inespecífico que imita el agua.
Usado para análisis del agua.
Agar cetrimida
Medio utilizado para
el aislamiento selectivo de Pseudomonas
aeruginosa y de otras especies del género Pseudomonas.
Medios para
hongos
el Agar glucosado de Sabouraud
es usado para cultivar hongos y tiene un pH bajo que inhibe el crecimiento de
la mayoría de bacterias, además tiene un antibiótico (gentamicina) que inhibe
específicamente el crecimiento de bacterias gramnegativas.
Agar Infusión Cerebro Corazón
Es un medio muy rico en
nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollo microbiano. La infusión de
cerebro de ternera, la infusión de corazón vacuno y la peptona, son la fuente
de carbono, nitrógeno, y vitaminas. La glucosa es el hidrato de carbono
fermentable, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el fosfato
disódico otorga capacidad buffer.
es un medio utilizado
para el cultivo de hongos y levaduras a partir de muestras de alimentos,
derivados de leche y productos cosméticos.
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